Kryo-Elektronenmikroskopie
Die zentrale Einrichtung für Kryo-Elektronenomikroskopie bietet einen erleichterten Zugang zu einem Titan-Krios G3 mit einer X-FEG-Quelle, 300 kV, Selectris-Energiefilter und einer Falcon IVi-Kamera mit direkter Elektronendetektion. Der Aufbau ist für hochauflösende Bilderfassung mit hohem Durchsatz zur Strukturbestimmung durch Einzelpartikel-Bildanalyse optimiert. Die Bildaufnahme kann im linearen Modus oder im Zählmodus erfolgen. Die Aufnahme wird mit EPU automatisiert und kann über mehrere Tage ohne weitere Eingriffe laufen. Typischerweise dauert die Datenerfassung 1-3 Tage. Bei Bedarf können auch längere Sitzungen durchgeführt werden.
Geschichte
Die Anlage wurde 2018 in Betrieb genommen. Im Januar 2023 wurde die Unterstützung für die Verarbeitung von Einzelpartikelbildern (3 Workstations) hinzugefügt, die eine Rechenumgebung für kleine Verarbeitungsprojekte (max. 6 Wochen), Schulungen und Verarbeitung im Auftrag von Nutzern bietet. Im September 2023 wurde das Kamerasystem auf eine Falcon IVi mit Selectris-Energiefilter für eine schnellere hochauflösende Erfassung im Zählmodus aufgerüstet.
Erwähnung in Danksagungen
Nehmen Sie die folgende Erklärung in die Danksagung Ihrer Veröffentlichung auf:
„Die Elektronen-Kryo-Mikroskopie wurde in der Kryo-EM-Anlage der Julius-Maximilians-Universität Würzburg durchgeführt, gefördert durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - 359471283, 456578072, 525040890.“
Zugang und Kontakt
Der Zugang ist gebührenpflichtig und wird durch eine Zugangsordnung geregelt, die Sie hier herunterladen können.
Wenn Sie an einem Zugang interessiert sind, ein Angebot benötigen oder Ihr Projekt besprechen möchten: Bitte kontaktieren Sie cryo-em@uni-wuerzburg.de
Veröffentlichungen von Nutzern
M. Gerovac, K. Chihara, L. Wicke, B. Bottcher, R. Lavigne, J. Vogel (2024) Phage proteins target and co-opt host ribosomes immediately upon infection. Nat Microbiol 9: 787-800
S. Endres, S. Ehrmanntraut, L. Endres, K. Can, C. Kraft, T. Rasmussen, R. Luxenhofer, B. Bottcher, B. Engels and A. C. Poppler (2023) Structural Investigation on How Guest Loading of Poly(2-oxazoline)-Based Micelles Affects the Interaction with Simulated Intestinal Fluids. 10.1021/acsbiomaterials.3c00645
S. Sekulovski, L. Susac, L. S. Stelzl, R. Tampe and S. Trowitzsch (2023) Structural basis of substrate recognition by human tRNA splicing endonuclease TSEN. 30. 834-840.
S. Endres, E. Karaev, S. Hanio, J. Schlauersbach, C. Kraft, T. Rasmussen, R. Luxenhofer, B. Bottcher, L. Meinel and A. C. Poppler (2022) Concentration and composition dependent aggregation of Pluronic- and Poly-(2-oxazolin)-Efavirenz formulations in biorelevant media. J Colloid Interface Sci 606, 1179-1192.
L. T. Alexander, R. Lepore, A. Kryshtafovych, A. Adamopoulos, M. Alahuhta, A. M. Arvin, Y. J. Bomble, B. Bottcher, C. Breyton, V. Chiarini, N. B. Chinnam, W. Chiu, K. Fidelis, R. Grinter, G. D. Gupta, M. D. Hartmann, C. S. Hayes, T. Heidebrecht, A. Ilari, A. Joachimiak, Y. Kim, R. Linares, A. L. Lovering, V. V. Lunin, A. N. Lupas, C. Makbul, K. Michalska, J. Moult, P. K. Mukherjee, W. S. Nutt, S. L. Oliver, A. Perrakis, L. Stols, J. A. Tainer, M. Topf, S. E. Tsutakawa, M. Valdivia-Delgado and T. Schwede (2021) Target highlights in CASP14: Analysis of models by structure providers. Proteins
V. J. Flegler, A. Rasmussen, K. Borbil, L. Boten, H. A. Chen, H. Deinlein, J. Halang, K. Hellmanzik, J. Loffler, V. Schmidt, C. Makbul, C. Kraft, R. Hedrich, T. Rasmussen and B. Bottcher (2021) Mechanosensitive channel gating by delipidation. Proc Natl Acad Sci U S A 118, e2107095118.
A. Grauel, J. Kagi, T. Rasmussen, I. Makarchuk, S. Oppermann, A. F. A. Moumbock, D. Wohlwend, R. Muller, F. Melin, S. Gunther, P. Hellwig, B. Bottcher and T. Friedrich (2021) Structure of Escherichia coli cytochrome bd-II type oxidase with bound aurachin D. Nat Commun 12, 6498.
C. Grimm, J. Bartuli, B. Boettcher, A. A. Szalay and U. Fischer (2021) Structural basis of the complete poxvirus transcription initiation process. Nat Struct Mol Biol 28, 779-788.
F. B. Heiss, J. L. Daiss, P. Becker and C. Engel (2021) Conserved strategies of RNA polymerase I hibernation and activation. Nat Commun 12, 758.
C. Makbul, V. Khayenko, H. M. Maric and B. Bottcher (2021) Conformational Plasticity of Hepatitis B Core Protein Spikes Promotes Peptide Binding Independent of the Secretion Phenotype. Microorganisms 9, 956.
C. Makbul, C. Kraft, M. Grießmann, T. Rasmussen, K. Katzenberger, M. Lappe, P. Pfarr, C. Stoffer, M. Stöhr, A.-M. Wandinger and B. Böttcher (2021) Binding of a Pocket Factor to Hepatitis B Virus Capsids Changes the Rotamer Conformation of Phenylalanine 97. Viruses 13, 2115.
V. J. Flegler, A. Rasmussen, S. Rao, N. Wu, R. Zenobi, M. S. P. Sansom, R. Hedrich, T. Rasmussen and B. Bottcher (2020) The MscS-like channel YnaI has a gating mechanism based on flexible pore helices. Proc Natl Acad Sci U S A 117, 28754-28762.
C. Makbul, M. Nassal and B. Bottcher (2020) Slowly folding surface extension in the prototypic avian hepatitis B virus capsid governs stability. Elife 9, e57277.
K. Stokes, A. Winczura, B. Song, G. Piccoli and D. B. Grabarczyk (2020) Ctf18-RFC and DNA Pol form a stable leading strand polymerase/clamp loader complex required for normal and perturbed DNA replication. Nucleic Acids Res 48, 8128-8145.
J. Wiest, J. Kehrein, M. Saedtler, K. Schilling, E. Cataldi, C. A. Sotriffer, U. Holzgrabe, T. Rasmussen, B. Bottcher, M. Cronin-Golomb, M. Lehmann, N. Jung, M. Windbergs and L. Meinel (2020) Controlling Supramolecular Structures of Drugs by Light. Mol Pharm 17, 4704-4708.
N. Famelis, A. Rivera-Calzada, G. Degliesposti, M. Wingender, N. Mietrach, J. M. Skehel, R. Fernandez-Leiro, B. Böttcher, A. Schlosser, O. Llorca and S. Geibel (2019) Architecture of the mycobacterial type VII secretion system. Nature 576, 321-325.
C. Grimm, H. S. Hillen, K. Bedenk, J. Bartuli, S. Neyer, Q. Zhang, A. Huttenhofer, M. Erlacher, C. Dienemann, A. Schlosser, H. Urlaub, B. Böttcher, A. A. Szalay, P. Cramer and U. Fischer (2019) Structural Basis of Poxvirus Transcription: Vaccinia RNA Polymerase Complexes. Cell 179, 1537-1550 e19.
T. Rasmussen, V. J. Flegler, A. Rasmussen and B. Böttcher (2019) Structure of the Mechanosensitive Channel MscS Embedded in the Membrane Bilayer. J Mol Biol 431, 3081-3090.
B. Song, J. Lenhart, V. J. Flegler, C. Makbul, T. Rasmussen and B. Böttcher (2019) Capabilities of the Falcon III detector for single-particle structure determination. Ultramicroscopy 203, 145-154.
A. Thesseling, T. Rasmussen, S. Burschel, D. Wohlwend, J. Kagi, R. Muller, B. Böttcher and T. Friedrich (2019) Homologous bd oxidases share the same architecture but differ in mechanism. Nat Commun 10, 5138.
